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质谱流式细胞仪Helios CyTOF

作者:口腔实验室  来源:广西医科大学口腔医学院科研实验室  发布时间:2021-12-19

Helios质谱流式细胞仪

品牌:Fluidigm(富鲁达,美国)

型号:Helios CyTOF



质谱流式细胞仪所运用的质谱流式技术采用非放射性的重金属同位素作为抗体的标签,在经过抗体孵育后,细胞被逐个送入等离子炬中进行离子化,使标签金属离子得以释放并被进一步送入飞行时间检测室(time-of-flight chamber)中进行检测,检测器会精确记录设计并换算为各种标签同位素的精确含量,并通过适配软件分析输出数据。


基于该技术原理,Helios质谱流式系统相较于传统的流式技术:

1、信号精确

高纯度的非放射性金属同位素确保了最低的背景噪音:金属标签通过多聚螯合物实现与抗体的共价偶联,该金属螯合物与细胞组分的非特异性结合极低,并且不存在传统方法中荧光重叠的问题,无需进行补偿操作,准确客观地反应数据。



传统流式荧光基团发射光谱图质谱流式原子质量谱图


2、拓展了检测通道数

Helios质谱流式细胞仪中配备的ICP-TOF质谱装置具有非常宽的原子量检测范围(88 - 210Da),可同时分析单细胞表面和内部40种以上的标记物,还可继续将检测通道数量扩展到135个,为进一步加入新标签(标记物)做好了准备,充分满足对生物样本全面分析的要求。

3、设计方案灵活

检测通道数的增加不仅仅扩大了是通量,更重要的是是实验设计更加灵活和完善,通过对细胞表面标记物和内部信号因子的全方位分析,可以帮助科研人员更加精确地进行细胞亚群分析,寻找那些重要的或稀有的未知亚群。


实验室设备实景图


应用领域:

1.  免疫学领域:观察骨髓、脾脏、淋巴节等免疫器官中各种免疫细胞的分布和活性,对免疫细胞进行自动分群,并对免疫细胞的功能多态性进行细致分析,实现对细胞群体进行精准的免疫分型,对细胞内信号传导网络进行全面的分析,分析细胞亚群之间的功能联系,以及对于大量样品的高通量多参数检测。

2. 血液学领域:对复杂的样品进行精细的免疫分型和信号通路分析,用于用药或手术后的恢复预测;

3. 肿瘤微环境领域:对癌症组织进行精细的亚群分析,更加透彻的研究肿瘤微环境,帮助研究者找到与临床预后密切相关的细胞亚群;

4. 干细胞领域:深入探讨当前技术下所区分出的干细胞群体的异质性,对于以后干细胞治疗等领域具有重要的指导意义;

5. 药物研发:发现新的用药靶点,追踪顺铂、以及纳米金/银作为载体的药物在组织中的定位和分析其对组织细胞形态和功能的影响;

6. 疫苗研发:与组合标记技术相结合,实现对大量样品的高通量流式分析,用作疫苗研发、药物筛选等应用性研发的高通量筛选技术平台。


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